生、熟小米提取物降糖效果研究(三)
2.5生、生熟熟小米提取物的小米总抗氧化能力比较
由图3可知,不同提取物浓度与总抗氧化能力呈剂量依赖关系。提取糖效当样品质量浓度为30mg/mL时,物降UM-C、果研UM-HX、生熟UMEA、小米UM-BT和UM-W的提取糖效总抗氧化能力分别为(1.25±0.00),(0.33±0.01),物降(0.50±0.00),果研(0.93±0.01)及(1.92±0.02)mmol/L/mg(图3a)。生熟说明生小米水提物的小米抗氧化能力优于有机溶剂相,随提取溶剂极性的提取糖效减小,相应提取物的物降总抗氧化能力减弱。当样品质量浓度为30mg/mL时,果研M-C、M-HX、M-EA、M-BT及M-W的总抗氧化能力分别为(0.97±0.00),(0.17±0.00),(1.09±0.00),(0.91±0.01)及(1.51±0.01)mmol/L/mg。小米熟化后的70%乙醇提取物、正己烷及水提物总抗氧化能力降低,乙酸乙酯提取物总抗氧化能力升高。
2.6各提取物对α-淀粉酶抑制作用
α-淀粉酶抑制剂是一种糖苷酶抑制剂,通过抑制消化道内淀粉酶活性,降低碳水化合物的水解和吸收,从而降低餐后血糖,用于糖尿病的预防与治疗。各提取物对α-淀粉酶作用如图4所示,其中,70%乙醇粗提物、正己烷提取物、乙酸乙酯提取物及正丁醇提取物对α-淀粉酶均有一定的抑制作用,而水提取对α-淀粉酶则有促进作用。说明在小米中,起到降低餐后血糖作用的物质主要集中在70%乙醇粗提物、正己烷提取物、乙酸乙酯提取物及正丁醇提取物中,在0.125~8.00mg/mL范围内,这4种提取物对α-淀粉酶的抑制作用随浓度的增高而增强。在样品质量浓度4~8mg/mL范围内,抑制作用趋于平稳,整体的抑制率未达到50%。当质量浓度为8mg/mL时,UM-C、UM-HX、UM-EA及UM-BT的抑制率分别为(29.89±0.64)%,(40.06±1.66)%,(40.86±0.26)%及(31.47±0.76)%(图4a)。
熟小米提取物对α-淀粉酶作用结果与生小米类似,M-W有较强的酶促进作用。而M-HX及M-EA对酶的抑制作用相近(图4b)。当质量浓度为8mg/mL时,M-C、M-HX、M-EA、M-BT的α淀粉酶作用分别为(13.61±2.94)%,(39.61±0.36)%,(39.00±0.01)%,(21.08±1.85)%。
由图4a、图4b和表3可知,各提取物的α-淀粉酶抑制作用为UM-EA>UM-HX>M-HX>M-EA>UM-BT>UM-C>M-BT>M-C。除M-HX、MEA、UM-HX及UM-EA相近外,其它两种熟小米提取物的酶抑制作用都低于生小米相应的提取物,说明小米中抑制α-淀粉酶活性的物质具有热敏性。但无论是生小米还是熟小米提取物的酶抑制作用都不及阳性对照阿卡波糖(IC50为0.545mg/mL)。
3讨论
小米作为一种粮食作物,其主要成分为淀粉、蛋白、脂肪、膳食纤维,还包含一些微量物质如多酚、胡萝卜素等。小米中的类黄酮主要为黄酮类化合物,有异/东方红素、异/牡荆素、木犀草素、芹菜素等。有研究表明异/东方红素及异/牡荆素等黄酮类化合物可有效抑制α-淀粉酶作用,调节餐后高血糖,调节由高糖诱导的炎症反应,降低糖尿病并发症及粥样动脉硬化。70%乙醇提取物中富含丰富的蛋白、黄酮及维生素,赋予了其较高的生物活性。与本研究结果一致,小米70%乙醇提取物对糖尿病大鼠的糖脂代谢具有一定的调节作用,并且生、熟小米的差距较大。其中生小米70%乙醇提取物的降糖效果显著高于熟小米70%乙醇提取物。生小米70%乙醇提取物虽然不会降低大鼠血清中TG、TC含量,但可显著提高HDL含量。为进一步确定小米中的降糖活性成分,利用不同极性溶剂对粗提物进行分级萃取,得到4种溶剂萃取物。通过抗氧化活性及酶抑制作用进一步比较,发现具有较高抗氧化活性的水提物,对α-淀粉酶反而有促进作用。这可能是由于水提物中的某类物质改变了催化α-淀粉酶所需的3个酸性氨基酸残基从而促进了α-淀粉酶。有待进一步确定水提物中的成分及与α-淀粉酶的作用,才能更好地解释促进作用机制。抗氧化活性很低的正己烷提取物有较好的酶抑制作用,说明降糖效果的高低与抗氧化活性并无必然关系,小米中主要起降糖作用的物质集中在极性较低的溶剂中。熟化后,正己烷萃取物的DPPH及总抗氧化能力均降低,但是酶抑制作用没有改变,说明起降糖效果的物质为非热敏性组分。而正己烷萃取物中主要富集脂肪酸类物质,小米中脂肪酸含量为2.54%~5.85%,大部分品种在4.00%左右,高于大米和小麦,并且脂肪酸结构合理。脂肪酸组成中,油酸、亚麻酸、亚油酸含量在75.00%以上,其中亚油酸为主要脂肪酸。有研究表明亚油酸可降低血脂及改善血糖。而熟小米70%乙醇提取物的降糖效果低于生小米70%乙醇提取物,可能是由于其中水溶性成分负面作用的增强。有待对小米降糖组分筛选及降糖机制进一步研究。
4结论
生、熟小米提取物的抗氧化及降糖能力存在差异。其中生小米70%乙醇提取物可显著改善糖尿病大鼠的糖代谢异常,而熟小米70%乙醇提取物没有此效果。除乙酸乙酯提取物外,熟化降低了小米萃取物的总抗氧化活性;但提高了70%乙醇提取物及正丁醇萃取物的DPPH清除能力。抗氧化较低的低极性溶剂正己烷及乙酸乙酯萃取物有较好的α-淀粉酶抑制作用,并且降糖物质为非热敏性。
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